چکیده:
مقدمه : miRNAها مولکولهای RNA تک رشته ای غیرکدکننده به طول حدود ٢١ تا ٢٣ نوکلئوتید هستند که ترجمه نمی شوند و در کنترل بیان ژن نقش مهمی دارند. آنها به عنوان انکوژن یا تومور ساپرسور نقش مهمی در بروز برخی سرطانها دارند. در گزارشات مختلف 182-miR به عنوان آنکومیر در سرطان گردن رحم معرفی شده است که مانع از انجام آپوپتوز در سلول می گردد. هدف از مطالعه حاضر بررسی تاثیر 182-AntimiR در رده سلولی سرطانی Hela روی القای آپوپتوز در حضور داروی سیس پلاتین و کاهش مقاومت دارویی می باشد. مواد و روشها: پس از کشت سلولهای Hela با افزودن دوزهای مختلف داروی سیس پلاتین و بررسی میزان مرگ و میر سلولها به روش MTT، میزان LD50 دارو به دست آمد. سپس با استفاده از حجم های مختلف لیپوفکتامین و miR کنترل نشاندار شده شرایط ترانسفکشن بهینه و غلظت اپتیمم 182-AntimiR محاسبه گردید. در نهایت 182-AntimiR و سیس پلاتین به طور مجزا و همزمان به سلولهای Hela منتقل و میزان کاهش تکثیر سلولی و افزایش آپوپتوز ناشی از مهار به وسیله 182-AntimiR به تنهایی و همراه با سیس پلاتین با روش MTT و فلوسایتومتری مورد ارزیابی قرار گرفت . نتایج : نتایج حاصل بیانگر آن است که تیمار سلولها با 182-AntimiR و سیس پلاتین موجب افزایش معنی دار مرگ سلولها از ٦٨% (تیمار با سیس پلاتین ) به ٨١% (تیمار همزمان با 182-AntimiR و سیس پلاتین ) شده است (0.05>P). این افزایش به صورت آپوپتوز و نکروز سلولها می باشد. نتیجه گیری: مطالعه حاضر نشان می دهد که بیان 182-miR ممکن است در افزایش مقاومت به شیمی درمانی سلولهای سرطانی نقش داشته باشد. استفاده از 182-AntimiR توام با سیس پلاتین منجر به تقویت اثر سیس پلاتین و در نتیجه کاهش غلظت LD50 سیس پلاتین می شود، بنابراین می توان از آن به عنوان یک درمان مکمل به منظور افزایش حساسیت سلولهای سرطانی به درمان و کاهش مقاومت دارویی استفاده کرد.
خلاصه ماشینی:
"پس از ٢٤ ساعت میکرولیتر از لیپوفکتامین ترکیب و عمل ترانسفکشن انجام شد و بعد از انکوباسیون در ٣٧ درجه سانتی گراد و ترانسفکشن میزان nM50 از ٢٤ ساعت با استفاده از میکروسکوپ فلورسنت ، شدت فلورسنت حاصل 182-AntimiR به سلول ها و افزودن μM30 داروی سیس پلاتین در سلول ها در غلظت های مختلف لیپوفکتامین مورد بررسی قرار گرفت (LD50)، به مدت ٣٦ ساعت در انکوباتور CO2 و ٣٧ درجه سانتی گراد (با شمارش تعداد سلول های ترانسفکت شده در مقایسه با سلول های قرار داده شدند.
و بیان بسیاری از شده با سیس پلاتین ، به همراه سلول های کنترل و سلول های ژن های روند آپوپتوز از جمله ٨ TRAIL-R, IRAK,caspase و دریافت کننده 182-AntimiR با Annexin V و PI مجاور و میزان 27 / طبق گزارشات با سرکوب آن تقریبا ٢٠% ژن های مسیر چرخه سلولی تأثیر مهار آن به کمک 182-AntimiR روی میزان آپوپتوز سلول نمودار ٤-بررسی تأثیر تیمار سلول Hela با 182-AntimiR و داروی cisplatin الف ) بررسی تأثیر انتقال 182-AntimiR در مقایسه با control AntimiR را نشان می دهد، که افزایش 182-AntimiR در یک روش وابسته به غلظت و به طور معنی دار (0.
بررسی شد، نتایج حاصل بیانگر افزایش آپوپتوز در سلول های تیمار مطالعات مختلف نشان داده است که 182-miR به عنوان یک انکومیر شده با 182-AntimiR است لذا کاهش میزان 182-miR موجب القاء mRNA مربوط به FOXO1 (به عنوان یک تومور ساپرسور) را تخریب آپوپتوز می گردد باتوجه به نتایج حاصل ژن های مؤثر در آپوپتوز در و باعث کاهش بیان این پروتئین می گردد در نتیجه مسیر آپوپتوز سلول Hela تحت کنترل 182-miR بوده و کاهش آن موجب القاء سلولی متوقف و تکثیر سلول های سرطانی را القاء می کند (١٥)."