چکیده:
برای انتقال موثر ژن در گیاهان به وسیله اگروباکتریوم ابتدا باید روش کارآمدی برای باززایی از آن گیاه
در اختیار داشت. برای رسیدن به این مهم در این تحقیق از ریزنمونه لپه پنج رقم بومی گوجه فرنگی در ایران
(Karun ،TN-V2-1109 ،TIV-VC-993،TN-VC-1088،TIV-VC-99C) استفاده شد. آزمایش به صورت فاکتوریل با طرح کاملا تصادفی با ٥ رقم در محیط کشت پایه موراشیک و اسکوگ MS) با ترکیب های مختلف از هورمونهای نفتالین اسیتیک اسید ٠/٠٧ ،٠/١٥ ،٠/٣) (NAA میلیگرم در لیتر) و بنزیل امینوپورین BAP) ٣ میلی گرم در لیتر) در ٤ تکرار انجام شد. براساس ،١/٥) تحقیق انجام شده بالاترین میزان باززایی مربوط به رقم کارون و محیط کشت موراشیگ و اسکوگ و سطوح هورمونی 1/5 میلی گرم در لیتر BAP و .03 میلی گرم در لیتر NAA بود. در این پژوهش آنتیبیوتیکهای کانامایسین، سفوتاکسیم، محرکهای فنولی گیاهی مثل استوسرینگون، غلظت و مدت
زمان تلقیح ریزنمونه با اگروباکتریوم به عنوان عوامل تاثیرگذار در انتقال ژن به گیاه گوجه فرنگی نیز مورد
بررسی قرار گرفتند. نتایج نشان داد که در میان غلظتهای مختلف باکتری و زمانهای تلقیح باکتری، غلظت OD= 0.6 باکتری و مدت زمان ٣٠ دقیقه بیشترین میزان تراریختگی (با استفاده از روش پی سی ار را داشت. از بین غلظتهای مختلف سفوتاکسیم تنها در غلظت 0.01 میلی مولار هیج باکتری قادر به رشد نبود. بهترین غلظت استوسرینگون برای تلقیح ژن با ریزنمونه گیاهی غلظت0.02 میلی مولار استوسرینگون بدست آمد.
خلاصه ماشینی:
در این پژوهش آنتیبیوتیکهای کانامایسین، سفوتاکسیم، محرکهای فنولی گیاهی مثل استوسرینگون، غلظت و مدت زمان تلقیح ریزنمونه با اگروباکتریوم به عنوان عوامل تاثیرگذار در انتقال ژن به گیاه گوجه فرنگی نیز مورد بررسی قرار گرفتند.
شکل (1) مراحل باززایی گیاه گوجهفرنگی: A: ریزنمونه ها B : گیاه باززا شده C : سازگاری گیاه به محیط بیرون D : گیاه کامل (به تصویر صفحه رجوع شود) نمودار (1) اثر متقابل هورمون های NAA و BAP برروی باززایی گیاه گوجه فرنگی (به تصویر صفحه رجوع شود) در هر ستون، حرف مشترک نشاندهنده عدم وجود اختلاف معنادار در سطح احتمال 5% بر اساس آزمون دانکن میباشد.
نمودار (3) مربوط به مقایسه میانگین اثر OD های مختلف آگروباکتریوم و زمان های مختلف تلقیح بر باززایی گیاه (به تصویر صفحه رجوع شود) در هر ستون، حرف مشترک نشان دهنده عدم وجود اختلاف معنادار در سطح احتمال 5% بر اساس آزمون دانکن می باشد.
برای القاء ساقهزایی، غلظتهای پایین تر از 50 میلی گرم در لیتر کانامایسین، در محیط کشت ساقهزایی گیاهان تراریخته احتمالی مورد استفاده قرار گرفت ولی کاهش غلظت این آنتی بیوتیک نیز در ساقه زایی موءثر نبود.
Tomato transformation and transgenic plant production.
Transgenic tomato __ plants expressing the Arabidopsis NPR1 gene display enhanced resistance to a spectrum of fungal and bacterial diseases.
A liquid culture system for Agrobacterium- mediated transformation of tomato (Lycopersicon esculentum Mill.